抗ウイルス薬および抗レトロウイルス薬ジャーナル
オープンアクセス

概要

HIV-1 gp120タンパク質とDC-SIGNの相互作用を阻害する物質を同定するための新しいハイスループットスクリーニングアッセイ

トゥオン・H・トラン、ラシャ・エル・バズ、アンドレア・クコナティ、ジェームズ・アルトス、プージャ・ジェイン、ザファル・K・カーン

2010 年の UNAIDS 報告書によると、高度活性抗レトロウイルス療法 (HAART) にもかかわらず、約 3,400 万人がヒト免疫不全ウイルス 1 型 (HIV-1) に感染しています。ARV 療法は効果的ですが、経済的に困難な国では維持できないコストの推移、深刻な副作用、薬剤耐性株の発生など、多くの欠点があります。特に HIV-1 感染の早期制御のために、ARV 療法の代替療法を開発するためのいくつかの対策が進行中ですが、効率的な薬剤ターゲットとアッセイがないため、潜在的な ARV 分子の探索が妨げられています。粘膜組織に存在する樹状細胞は、CD4+ T リンパ球およびマクロファージとともに、HIV-1 に遭遇する最初の細胞の 1 つです。樹状細胞特異的細胞間接着分子 3 捕捉非インテグリン (DC-SIGN) 分子は、ウイルスエンベロープ糖タンパク質 gp120 との高親和性相互作用を介して HIV-1 を結合する上で重要な役割を果たします。 DC-SIGN は、直腸、子宮、子宮頸部の粘膜組織の細胞に発現するマンノース結合 C 型レクチンで、性行為による感染後の HIV-1 感染初期を促進する。本研究では、DC-SIGN と gp120 の結合と阻害を定量化できる、新しいターゲット特異的ハイスループットスクリーニング (HTS) アッセイを報告する。アッセイの特異性は競合阻害によって決定され、DMSO 耐性 (0.5%)、Z' 係数 (0.51)、信号対雑音比 (3.26)、変動係数 (5.1%) について最適化が行われた。アッセイの検証では、DC-SIGN/gp120 結合の既知の拮抗薬を試験して阻害を検出し、HIV-1 感染初期を防ぐ可能性のある DC-SIGN と gp120 の結合をブロックする潜在的阻害剤の将来の HTS スクリーニングに本アッセイが適していることを実証した。