質量分析と精製技術
オープンアクセス

概要

ヒト胆汁中のグリココール酸の定量のためのシンプルな希釈・注入フローインジェクション質量分析法

ラガヴィ・カカルラ、ラーマクリシュナ・レディ・ヴォッグ、ジャネット・ドナルドソン、バオチュアン・グオ

グリココール酸は胆管癌患者の胆汁中で高値を示し、この疾患の潜在的なバイオマーカーとなっている。グリココール酸の定量に液体クロマトグラフィー質量分析法を用いる場合、抽出に時間がかかる、キャリーオーバーがある、ブランク胆汁マトリックスが用意できないなどの問題が生じることが多い。これらの問題を克服するため、我々は胆汁中のグリココール酸を定量する希釈・シュートフローインジェクションタンデム質量分析法（標準添加ベース）を開発した。まず胆汁を希釈し、続いてグリココール酸標準物質と内部標準物質を希釈胆汁に添加し、その後直接フローインジェクション（クロマトグラフィー分離なし）でエレクトロスプレーイオン化源に注入した。検出はネガティブマルチプルリアクションモニタリングモードで行い、グリココール酸と内部標準物質のm/z遷移はそれぞれ464.1→74.0と401.2→249.1に設定された。標準添加検量線を作成し、ヒト胆汁中に存在するグリココール酸の量を測定しました。この方法は、FDA ガイドラインに従って臨床サンプルで検証されています。直線性は、12.5 ～ 200 ng/mL の添加濃度範囲で達成され、相関係数は 0.9857 でした。この方法は、正確性、精度に優れ、マトリックス効果が最小限で、800,000 倍に希釈した後でもグリココール酸を定量できるほど十分な感度を備えています。結論として、希釈およびシュートフローインジェクション MS/MS 法が初めて開発され、検証されました。この方法は、臨床現場でヒト胆汁中のグリココール酸の日常的な分析に使用できます。