細胞科学と治療のジャーナル
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概要

成体マウス骨髄由来多能性間葉系幹細胞の分離、増殖、特性評価、分化のための簡単な方法

ジテンドラ・クマール・チョーダリー氏とプラモド・C・ラス氏

間葉系幹細胞（MSC）は、紡錘形、接着性、クローン形成性、非貪食性、線維芽細胞性、多能性の性質を持ち、自己複製および増殖の固有の能力を備えています。骨髄は、増殖、自己複製、および多系統分化の基礎プロセスを研究するためのMSCの最も豊富な供給源です。マウス骨髄からの間葉系幹細胞の分離、増殖、特性評価、および分化の方法を改善する研究がいくつか行われてきましたが、広く受け入れられているものはありません。MSC培養の普遍的に受け入れられる方法がないため、この方向で継続的な努力が行われています。ここでは、in vitroでのMSCの分離、培養、増殖、および分化の全体的な方法を改善することを目的として、いくつかの微妙な変更を加えた簡単な方法を報告します。このプロトコルに従って、走査型電子顕微鏡で示されるように、典型的な紡錘形の形態を持つMSCを分離しました。これらの細胞は、MSC特異的マーカーであるCD29（98.94% ± 0.67%）、CD44（84.27% ± 7.77%）、Sca-1（92.70% ± 3.81%）の発現も示し、CD45（0.40% ± 0.10%）、CD34（0.15% ± 0.05%）、CD11b（0.45% ± 0.15%）などのHSC特異的マーカーの発現はごくわずかでした。MSCは、脂肪細胞、骨細胞、軟骨細胞などの中胚葉系統や、外胚葉ニューロン様細胞に分化することもわかりました。さらに、MSCは、Oct4、Nanog、Sox2、Mycなどの多能性関連転写因子の差次的基礎発現を示しました。上記の知見に基づいて、実験および応用目的でマウス骨髄から多能性 MSC を分離、培養、増殖、および特性評価するために使用できる簡単なプロトコルを提案します。