化学療法: オープンアクセス
オープンアクセス

概要

アルファフェトプロテインは肝臓がん細胞におけるベンジルイソチオシアネートの細胞周期停止に拮抗する役割を果たす

Mingye Zhu、Wei Li、Xu Dong、Peng Zhou、Junli Guo、Mengsen Li

背景: アルファフェトプロテイン (AFP) がベンジルイソチオシアネート (BITC) によるヒト肝癌細胞株の細胞周期停止に及ぼす影響を in vitro で調査し、BITC が肝細胞癌 (HCC) 細胞の増殖を阻害する可能性のある役割メカニズムを調査する。方法: この研究では、HCC 細胞株、Bel 7402 および HLE をテストに選択した。蛍光顕微鏡法とウェスタンブロッティングを使用して、タンパク質のトランスフェクション効果と発現を観察し、MTT アッセイで HCC 細胞の増殖を調べた。フローサイトメトリー法を使用して細胞周期を検出し、RNA 干渉を使用してテストし、発現ベクター構築技術を使用して、それぞれ AFP のサイレンシングと発現の誘導を行った。結果：分析の結果、BITC は用量依存的に HCC 細胞の増殖を著しく阻害する効果があり、Bel 7402 細胞に AFP-siRNA ベクターを導入すると阻害効果が増強されましたが、HLE 細胞に pcDNA3.1-afp ベクターを導入すると阻害効果が減弱しました。80 μmol/L BITC 処理後の AFP-siRNA を導入した Bel 7402 細胞と pcDNA3.1-afp を導入した HLE 細胞の増殖率は、(42.43 ± 4.92)% (P<0.05 vs Bel 7402 細胞群) および (40.13 ± 4.99)% (P<0.05 vs HLE 細胞群) でした。BITC は明らかにこれらの HCC 細胞で細胞周期 G2/M 期停止を引き起こすことができました。誘導効果は、AFP-siRNAを導入したBel 7402細胞では増強されたが、pcDNA3.1-afpを導入したHLE細胞では減弱した。BITCは、Bel 7402細胞およびHLE細胞において、細胞周期関連タンパク質であるサイクリンB1、CDK1、Cdc25cの発現を阻害したが、Weelの発現を刺激した。また、この効果は、AFP-siRNAを導入したBel 7402細胞では増強されたが、pcDNA3.1-afpを導入したHLE細胞では減弱した。結論：BITCは、サイクリンB1、CDK1、Cdc25cの発現をダウンレギュレーションし、Weelの発現をアップレギュレーションすることにより、HCC細胞の増殖を抑制し、細胞周期のG2/M期停止を誘導することができ、AFPは、HCC細胞におけるBITCの細胞周期停止に拮抗する役割を果たした。