歯学ジャーナル
オープンアクセス

概要

加齢性皮質白内障の水晶体組織における ERCC6 遺伝子の発現と DNA メチル化プロファイルの変化

Yong Wang、Guowei Zhang、Fei Li、Lihua Kang、Jindong Ben、Han Rong、Haijin Guan

紫外線（UV）誘発性DNA損傷は加齢性白内障（ARC）の発症に関与し、ヌクレオチド除去修復（NER）によって修復される。ERCC6によってコード化されたコケイン症候群相補群B（CSB）タンパク質はNER複合体の構成要素であることが知られている。DNAメチル化は主要なエピジェネティックイベントの1つであり、DNA 5-シトシンメチルトランスフェラーゼ（DNMT）によって触媒される。本研究は、水晶体組織のERCC6プロモーター領域におけるCpGアイランドのDNAメチル化がARC発症に及ぼす潜在的な寄与を調べることであった。本研究には、ヒト被験者の皮質型ARC水晶体15個と透明水晶体15個が含まれた。水晶体におけるERCC6およびDNMTの発現はqRT-PCRおよびウェスタンブロットによって分析された。ERCC6のメチル化状態を評価するために、亜硫酸水素塩シーケンスPCR（BSP）を実施した。 ERCC6発現におけるDNAメチル化の役割を確認するため、ヒト水晶体上皮B-3（HLE B-3）に脱メチル化剤5-アザ-2'-デオキシシチジン（5-アザ-dC）を添加したin vitro実験を行った。結果によると、ARCのLECと水晶体皮質ではERCC6のmRNAとタンパク質レベルが大幅に低下していた。ARCのLECでは、対照群と比較してDNMT3b mRNAが大幅に高かった。ARC群では、ERCC6プロモーター領域のCpGアイランドが対照群と比較してLECで高メチル化を示した。5-アザ-dC処理後、HLE B-3でERCC6タンパク質レベルが増加した。水晶体でのDNMT3bの過剰発現はERCC6のCpGアイランドの高メチル化と関連しており、ARC患者のLECでのERCC6発現低下につながっていると結論付けられた。 ERCC6 遺伝子のこのエピジェネティックな変化は、DNA 修復の障害によって媒介される ARC 形成の要因である可能性があります。