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概要

エクトサイクリックAMP非依存性タンパク質キナーゼ-L型カルシウムチャネルとヤギ（Capra indicus）精巣上体精子の前方運動の強力な調節因子

デブジャニ・ナスとミトゥン・ショー

目的:ヤギ (Capra indicus) 精子は、膜表面に新しいエクト cAMP 非依存性タンパク質キナーゼ (エクト CIK) を持っています。この酵素は、精巣上体における精子の成熟プロセスを通じて顕著な変化を示しました。私たちは、細胞内 [Ca2+] レベルを制御することにより、精巣上体精子の前進運動の調節における CIK の役割を調査しました。
方法:精巣上体尾部の成熟精子細胞を CIK 抗体で処理し、120 分の曝露で酵素活性の最大阻害 (85%) が観察されました。カルシウム取り込みメカニズムを分析するために、細胞を CIK 抗体で処理した後、45Ca2+ に曝露し、さまざまなカルシウムチャネル制御因子で前処理しました。細胞内 [Ca2+]i シグナルは、fura 2-AM を使用して蛍光定量的に測定しました。前進運動のパーセンテージを測定するために、コンピューター化された分光光度測定法を使用しました。
結果:細胞膜のL型電位依存性Ca2+チャネルを介したカルシウムの取り込みはCIKによって制御されることが示された。精子細胞をバラパミル(20μM)、ニフェジピン(20μM)で前処理すると、CIK抗体によって誘導される細胞内[Ca2+]iの増加が著しく阻害された。一方、カルモジュリン拮抗薬のトリフルオペラジンおよび w13 (N-(4-アミノブチル)-5-クロロ-2-ナフタレンスルホンアミド塩酸塩)、および強力なミトコンドリア阻害剤であるアジ化ナトリウムは、このカルシウム流入に影響を及ぼさなかった。 CIK 抗体処理細胞を ca イオノフォア A123187 で処理したところ、チャネル阻害剤に非感受性なカルシウム取り込みの増加が示された。 ベラパミル (20 μM) は、CIK 抗体処理精子の前進運動性を低下させる (約 50%) 上で重要な役割を果たすことが観察された。
結論: CIK は精巣上体精子の前進運動性の重要な調節因子であり、その調節は細胞内 [Ca2+]i レベルによって部分的に活性化され、その程度は電位依存性 L 型カルシウムチャネルによって機能的に付与されると結論付けた。