内科: オープンアクセス
オープンアクセス

概要

尿酸酸化酵素を生産できる細菌の遺伝子工学

Xin Cheng、Bo Yang、Dong Liu、L Juan He、Gan Chen、Yong Chen、R Fa Huang、Y Sheng Jiang

尿酸酸化酵素遺伝子をラクトバチルス・ブルガリアにクローン化し、尿酸を分解して高尿酸血症を治療する尿酸酸化酵素を生産しました。GenBank の Candida utilis 尿酸酸化酵素遺伝子配列 (ウリカーゼ、E12709) を使用して、PCR 増幅尿酸酸化酵素遺伝子断片をプラスミド pMG36e に挿入し、組み換えプラスミド PMG36e-U を構築し、次にこれをラクトバチルス・ブルガリアに電気的に形質転換しました。遺伝子組み換え細菌の細胞溶解物中の尿酸酸化酵素を SDS-PAGE で特定し、尿酸酸化酵素活性を測定しました。尿酸酸化酵素遺伝子は Candida utilis ゲノムから PCR 増幅しました。尿酸酸化酵素遺伝子を含む組み換えプラスミド PMG36e-U は、ラクトバチルス・ブルガリアに電気的に形質転換されました。遺伝子組み換え細菌によって合成された尿酸酸化酵素サブユニットの分子量は、SDS-PAGE に基づいて約 34 KD であり、細菌調製物からの in vitro 酵素活性は最大 0.33 u/mL でした。結論: 尿酸酸化酵素遺伝子は Lactobacillus bulgaria にクローン化され、尿酸を分解することに成功しました。