アルコール依存症と薬物依存のジャーナル
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概要

生体サンプル中のAtractylodes lanceaとその生理活性成分アトラシロジンの生物活性を測定するためのハイスループットバイオアッセイおよびHPLC-UV法：進行期胆管癌患者の薬物動態研究への応用

アヌラック・チョイマン、ナッダ・ムハマド、イントゥオン・クラマ、ケサラ・ナ・バンチャン*

本研究は、ヒト血清サンプル中のAtractylodes lancea (AL)の総生物活性を測定するためのハイスループットバイオアッセイ法を確立することを目的とした。さらに、AL の主な生物活性成分であるアトラクチロジン (ATD) の血漿濃度を測定するための簡単な HPLC-UV 法も開発された。バイオアッセイ法では、試験菌として黄色ブドウ球菌 (S. aureus) ATCC 25923 株を使用した。細菌増殖の阻害は MTT アッセイを使用して評価した。検量線は、血清中の濃度反応曲線 (0、0.39、0.78、1.56、3.13、2.56、および 50 ng/µl) から作成され、相関係数が 0.990 を超える直線性を示した。定量限界 (LOQ) は、20 µl 血清サンプルを使用して 1.66 µg/ml であった。 HPLC-UV アッセイ手順は、Hypersil Gold C18 カラムとアセトニトリルと水の比率 70:30 (v:v) からなる溶出溶媒を使用した逆相クロマトグラフィーに基づいて開発されました。UV 検出は 340 nm の波長に設定されました。検量線は血清 (0、0.39、0.78、1.56、3.13、2.56、および 50 ng/µl) の濃度反応曲線から作成され、相関係数 (r) が 0.990 を超える直線でした。LOQ は 1 ml の血漿サンプルを使用して 2.5 ng/ml でした。両方のアッセイ法は、AL の血清生物活性と ATD の血漿濃度の特異的、高感度、正確かつ再現性のある定量分析でした。