白血病ジャーナル
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概要

ヒト羊膜間葉系幹細胞は骨髄間葉系幹細胞と同様の免疫抑制能力を示し、体外でより高い増殖活性とより明確な幹細胞特性を有する

Ya Gao、Ying Xu、Jie Song、Jia-qiong Kong、Wei-bin Zhuo、Chun-yan Yang、Yu Zhang、Zhiping Fan、Yan-wu Guo、Chunyan Yue、Haai-tao Sun、Bao-hong Ping

目的: ヒト骨髄間葉系幹細胞 (hBMSCs) は、造血幹細胞移植後の患者の急性移植片対宿主病 (aGVHD) の予防と治療に使用されています。本研究では、ヒト羊膜間葉系幹細胞 (hAMSCs) と hBMSCs の生物学的特性と免疫抑制活性を比較し、aGVHD の治療における hAMSCs の潜在的使用に関する実験的証拠を提供し、hBMSCs 供給源不足の問題を解決しました。方法: HAMSCs は酵素消化によって分離しました。hBMSCs はフィコール-ハイパック密度勾配法を使用して分離しました。両方の幹細胞タイプの生物学的特性は、形態学的分析、細胞増殖の分析、細胞周期プロファイリング、免疫表現型解析、および免疫蛍光アッセイによって比較しました。 MSC と末梢血単核細胞 (PBMC) の in vitro 共培養を実施し、Cell Counting Kit-8 (CCK-8) アッセイを使用してリンパ球増殖を測定した。共培養上清中の IFN-γ 産生は、酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) を使用して測定した。結果: hAMSC と hBMSC は両方とも線維芽細胞様の形態を示した。hAMSC は少なくとも 15 回の培養継代を維持できたが、hBMSC は 6～7 回の継代で老化の兆候を示し始め、増殖が著しく低下した。hAMSC と hBMSC の G2/M 期の細胞の割合に有意差はなかった (P>0.05)。免疫表現型検査により、hAMSC と hBMSC の両方の表面で CD105、CD90、および CD73 の陽性発現と、CD34、CD45、CD11b、CD19、および HLA-DR の陰性発現が明らかになった。 hAMSCはOct-3/4陽性であったが、hBMSCは陽性ではなかった。hAMSCとhBMSCは両方ともビメンチンを発現した。PHA刺激PBMCの増殖は、hAMSCとhBMSCによって阻害された。この阻害は、MSCの割合が増加するにつれて強くなった。2種類のMSCのPBMC増殖に対する阻害効果に有意差はなかった（P>0.05）。PBMCをhAMSCまたはhBMSCと共培養した場合、単独で培養した場合よりもインターフェロン-γ（IFN-γ）産生が低下した（P<0.05）。PBMCをhAMSCと共培養した場合、hBMSCと共培養した場合よりもIFN-γ産生が低下した（P>0.05）。結論：本研究の結果は、hAMSCがhBMSCよりも増殖活性が高く、より明確な幹細胞特性を持つことを実証した。 hAMSC と hBMSC は両方とも、in vitro で同種末梢血リンパ球の増殖を抑制し、PHA によって刺激された IFN-γ 分泌を減少させることができました。