ISSN: 1948-5964
タオ・ドゥアン、モニク・ファーガソン、リンティアン・ユアン、ファンリン・シュー、グアンユー・リー
ウエストナイルウイルス(WNV)感染によるヒトの病気の進行は髄膜炎や脳炎を引き起こし、特に高齢者や免疫不全患者では死に至ることもあります。免疫グロブリンを用いた受動免疫は、WNV感染患者の治療に有効であることが示されており、ヒト抗WNV抗体の開発は重要です。本研究の目的は、WNVに対するFab特異的ファージディスプレイライブラリを構築し、中和活性を持つクローンを同定して選択することです。免疫された2人の個人の末梢血リンパ球(PBL)から全RNAを抽出し、RT-PCRを使用して重鎖(VH)と軽鎖(VL)を含むFabフラグメントを増幅しました。増幅された遺伝子は、組み換え抗体発現ベクターpComb3-Hに順次クローニングされ、Fab特異的ファージディスプレイライブラリはヘルパーファージVCS-M13とともにパッケージ化されました。 WNV E タンパク質ドメイン III を用いて 5 回のパンニングを実行し、その後 ELISA によって結合抗体を選択しました。