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概要

TLCブロットとMALDI-TOFの組み合わせによる複合脂質分子種のイメージング技術 -特にヒト脳ガングリオシド分子種について

タニア・バルデス＝ゴンザレス、後藤＝井上直子、早坂貴大、石山博信、瀬戸光敏、滝隆夫

ヒト海馬白質のスフィンゴ糖脂質およびリン脂質を、2次元TLC (2d-TLC)、TLCブロット装置による分離脂質のPVDF膜への転写、イオントラップ型MALDI-TOF装置による質量分析 (MS) の連続手順で分析した。この方法は簡単かつ迅速で、非常に少量のサンプル (脳組織0.1 mg) ですべての脂質成分を分析できる。2d-TLCは優れた分離を提供し、MS分析により個々の糖脂質およびリン脂質の分子種の特徴的なプロファイルを識別することができた。ガングリオシドのMS分析の結果、ジシアロガングリオシドおよびトリシアロガングリオシドはモノシアロガングリオシドよりもd20:1スフィンゴシン含有セラミドに富んでいることが示され、GM1ガングリオシド後のシアリル化選択の存在が示唆された。次に、MS イメージング技術を使用して、さまざまな脳領域から得られたガングリオシド分子種を分析しました。個々のガングリオシドの MS 画像は、分子種の分布に関して明確な視覚プロファイルを提供しました。イメージング プロファイルは領域に依存しており、GM1 ガングリオシドに対するシアリルトランスフェラーゼは d20:1 スフィンゴシン含有分子を選択する傾向があることも示しました。この技術により、個々のリン脂質およびスフィンゴ糖脂質分子種の視覚的特性が明らかになり、対象組織の代謝特性に関する情報が提供され、多彩な脂質組成研究への新たな扉が開かれました。