抗ウイルス薬および抗レトロウイルス薬ジャーナル
オープンアクセス

概要

カリブラコアモットルウイルス（CbMV）の感染性全長クローン

アンジュ・グラティ・サクジャとシン・イエ・リウ

カリブラコア・モットルウイルス（CbMV）のゲノムRNA（gRNA）およびサブゲノムRNA（sgRNA）由来の完全長cDNAクローンをT7 RNAプロモーターの制御下で構築し、プラスミドpUC-18に連結した。完全長ゲノムcDNAクローンpUC-CbMV-FLから合成されたキャップ付きおよびキャップなしのin vitro転写産物は、接種後10～15日以内に機械的に接種されたChenopodium quinoaにクロロシスの局所病変を生成した。接種された症状のある葉から回収された子孫ウイルス粒子は、親ウイルス粒子と同じ形態学的特性を有していた。これらのウイルス粒子は、二重抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着検定法（DAS-ELISA）でもCbMV抗血清と陽性反応を示し、ウイルスコートタンパク質はウェスタンブロット法で検出された。 CbMV ゲノム上に 5 つのオープン リーディング フレーム (ORF) が存在し、gRNA と sgRNA によって対応するタンパク質が合成されることが、ノーザン ブロット法と in vitro 翻訳によって確認されました。CbMV の 3 つの sgRNA の転写開始部位も特定されました。CbMV の完全長感染性 cDNA クローンの構築に成功したことで、このウイルスの遺伝子機能を理解するために使用できる分子ツールの開発が可能になりました。