音声学と聴覚学ジャーナル
オープンアクセス

概要

miR-24はマクロファージの分極と可塑性を制御する

ジェズロム・B・フォーダム、アフサール・R・ナクヴィ、サルバドール・ナレス

目的:マイクロRNA (miRNA) は、ヒトの生物学と免疫の普遍的な調節因子です。これまでに、miR-24 が大腸菌と黄色ブドウ球菌のバイオ粒子の貪食と、同じ起源のリポ多糖 (LPS) に反応してサイトカイン分泌を誘導する阻害的役割を果たすことを実証しました。また、歯周病原菌Aggregatibacter actinomycetemcomitams (Aa) とPorphyromonas gingivalis (Pg) の LPS に対する発散および収束 miRNA 反応を特定し、タバコの煙抽出物が Pg LPS 構造の環境修飾因子 (Pg CSE) としてマクロファージ miRNA 反応に影響を与えることを明らかにしました。この研究は、マクロファージの分極と可塑性に対する miR-24 の役割を調査するために設計されました。

方法:初代ヒトマクロファージは、末梢血単核細胞 (PBMC) から分離された CD14+ 単球から MACS 陽性選択によって分化され、miR-24 miRNA 模倣体、阻害剤、または陰性対照模倣体でトランスフェクトされ、続いてマクロファージ活性化の重要な段階を表すさまざまな条件下でサイトカインおよび/または LPS で刺激されました。マクロファージの活性化と分極は、サイトカイン産生 (ELISA) およびタンパク質発現 (フローサイトメトリー、免疫ブロット) のアッセイを使用して評価されました。miR-24 発現は RT-PCR によって評価されました。

結果: Aa、Pg、および Pg CSE 由来の LPS でマクロファージを刺激すると、サイトカイン発現レベルが異なり、miR-24 の差次的発現が生じた。miR-24 の過剰発現は、LPS に反応するサイトカイン分泌を阻害した。インターフェロン ガンマ (IFN-γ) でマクロファージをプライミングしてもこの阻害効果は克服されなかったが、IFN-γ と TNF-α、TNF-β、または IL-17 によるマクロファージの古典的活性化は、サイトカイン特異的な方法で miR-24 媒介抑制のパターンを調整した。miR-24 の過剰発現は、代替マクロファージ活性化中に CD206 の上方制御を促進し、代替活性化状態から古典的活性化状態に移行するマクロファージでの CD206 の下方制御を阻害した。miR-24 の過剰発現は、クラス 1A PI 3 キナーゼサブユニット p110 デルタ (p110δ) の発現を減少させた。

結論: LPS の病原体および環境特異的な修飾は、ヒトマクロファージのサイトカインおよび miR-24 の発現を変化させます。miR-24 は、LPS によるマクロファージの古典的な活性化の負の調節因子であり、分極および可塑性の条件下で代替活性化を促進します。LPS 誘導性サイトカイン分泌の miR-24 媒介阻害は、刺激時点でのマクロファージ活性化状態に依存しており、これは受容体連結をサイトカイン誘導に変換する細胞内シグナル伝達経路に p110δ が関与する程度によると考えられます。マクロファージに対する miR-24 の効果には重要な違いが見られましたが、これらのデータは、miR-24 の過剰発現が主に抗炎症性であることを示しています。