抗ウイルス薬および抗レトロウイルス薬ジャーナル
オープンアクセス

概要

HBVポリメラーゼの新規rtM204変異はアデホビルとテノホビルに対する感受性を低下させる

柯張、クリスチャン・バッハ、マリア・ノイマン＝フラウネ、ユチェン・シア、バスティアン・ベッゲル、ロルフ・カイザー、ヴェレーナ・シルトゲン、アンドレア・クレーマー、オリバー・シルトゲン、ウルリケ・プロッツァー

背景:慢性 HBV 感染の治療は耐性の選択によって制限されます。HBV 逆転写酵素の YMDD モチーフの rtM204I/V 変異は、ラミブジンおよびエンテカビルに対する耐性決定因子として十分に文書化されていますが、アデホビルまたはテノホビルに対する耐性決定因子として文書化されていません。後者の 2 つの薬剤については、限定された体系的な表現型データが利用可能です。

方法: rtM204 変異 (rtM204A/I/K/L/Q/S/T/V) を、CMV プロモーターの制御下にある複製能のある 1.1 倍 HBV オーバーレングス コンストラクトに体系的に導入しました。ウイルス複製適合性は、正規化された一過性トランスフェクション後に選択的 qPCR によって決定しました。in vitro 薬剤感受性は、標準化されたハイスループット表現型アッセイを使用して、ラミビドン、エンテカビル、アデホビル、テノホビルの IC50 値を決定して評価しました。感染性は、HepaRG 細胞の感染によって分析しました。

結果: in vitro 表現型解析により、rtM204K はアデホビルおよびテノホビルに対して高い耐性を付与するが、同時に複製能力を低下させることが示された。rtM204I/V の場合と同様に、rtL180M または rtL80I ではその適応度を回復できなかった。rtM204L および rtM204Q は、複製能力を低下させることなく、アデホビル/テノホビルに対する感受性を低レベルに低下させた。rtM204A/I/S/T は、いずれの薬剤に対しても感受性を大幅に低下させた。興味深いことに、単一変異 rtM204V は、両方の薬剤に対する感受性を大幅に低下させたが、代償変異 rtL180M との組み合わせで耐性を失った。重複する S 遺伝子に影響を及ぼすことにより、rtM204L を除く rtM204 変異体は、HepaRG 細胞における感染性が低下または減少した。

結論:時間と費用効率に優れた表現型アッセイを確立し、in vitro でアデホビルとテノホビルに交差耐性を付与する新しい rtM204 変異を特定しました。ウイルス集団における頻度は低いものの、ウイルスの適応度を回復させる可能性のある代償変異の潜在的な選択のため、その臨床的重要性を過小評価すべきではありません。