細胞科学と治療のジャーナル
オープンアクセス

概要

ヌクレオリンはHsp72を細胞膜に輸送し、微小環境への放出に備えている。

Appukuttan NR Pradeep, Alexzander Asea and Punit Kaur

目的: これまでの研究では、熱ストレスが古典的なタンパク質輸送経路とは独立したメカニズムによって細胞から Hsp72 の放出を誘導することが実証されています。しかし、リーダーレス タンパク質である Hsp72 が細胞外環境にアクセスできる正確なメカニズムは不明のままです。材料と方法: この研究は、細胞内 Hsp72 の移動と放出が起こるメカニズムを決定するために設計されています。この研究で提示されたデータは、ウェスタンブロッティングとフローサイトメトリーを使用して細胞内 Hsp72 の移動を示唆しています。また、ゲル内消化と LC-MS/MS を行って、未知の膜結合タンパク質を同定しました。結果: 細胞を熱ショック処理に初めてさらしてから 60 分以内に、細胞膜に結合した Hsp72 が剥がれ落ち、細胞質コンパートメントに再分配されることを実証しています。細胞をサイトカラシン B で前処理して能動細胞輸送を阻害すると、細胞膜から細胞質への Hsp72 の再分配が完全に無効になりました。細胞膜結合タンパク質を Hsp72 で架橋し、ウエスタンブロット分析と LC-MS/MS 分析を行った結果、ヌクレオリン、Hsp90、gp96、CAP2、TLR2、4、7 など、Hsp72 と相互作用する少なくとも 7 つのパートナーが明らかになりました。ヌクレオリン siRNA による細胞のトランスフェクションにより、ベースラインと熱ショック誘導による Hsp72 放出が完全に阻害されました。結論: 総合すると、この研究は、細胞膜が Hsp72 のリザーバーとして機能することを初めて実証し、ヌクレオリンが Hsp72 の輸送と放出に重要な役割を果たしていることを示唆しています。