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概要

LC-MRM質量分析法による血清サンプル中のゴナドトロピンと甲状腺刺激ホルモンの定量分析

アンナ・イリアーノ、キアラ・メルキオーレ、カルロ・チョーチ、ガブリエラ・ピント、フランチェスカ・ディ・レッラ、アレッサンドロ・コンフォルティ、ルイージ・カルボーネ、アンジェラ・アモレサーノ

ゴナドトロピンは、卵胞刺激ホルモン (FSH) や黄体形成ホルモン (LH) として、ヒト胎盤絨毛性ゴナドトロピン (hCG) や甲状腺刺激ホルモン (TSH) とともに糖タンパク質ホルモンのファミリーに属します。LH と FSH は生殖の重要な調節因子であり、卵巣と精巣におけるステロイド生成と配偶子形成を制御する内分泌的に作用します。今日では、高度に精製された組み換え型ゴナドトロピン製剤が性腺機能低下症や不妊症の治療に広く使用されています。したがって、血清ゴナドトロピンの正確な測定と特性評価は、患者治療のホルモン反応を監視するために不可欠ですが、その広範な異質性と血清中の濃度が非常に低いため、絶対定量化は大きな課題です。循環性ゴナドトロピンを定量化する基準法である酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) は、各バイオマーカー候補に対する高品質の抗体の可用性と抗原抗体親和性の特異性によって制限されます。

この研究の目的は、血清中のゴナドトロピン（LHおよびFSH）とTSHを定量するために、多重反応モニタリング（MRM）イオンモードのタンデム質量分析法に基づく、一般的な免疫アッセイの有効な代替法を確立することであった。開発された方法は、各ホルモンの3つの特定のプロトタイプペプチド（前駆体イオン）と3〜5つの最良のフラグメント（生成物イオン）をモニタリングすることにより、標的タンパク質の識別と定量化を可能にし、女性の小規模コホートの血清分析にうまく適用された。結果は、ELISAアッセイに匹敵する感度を示し、より高速でより選択的であるという利点がある。さらに、この方法は、日常的な分析の時間とコストを節約しながら、対象の他の血清タンパク質でも簡単に実装できる。