音声学と聴覚学ジャーナル
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概要

新規 LipHsp70 ELISA を用いた腫瘍患者の血液中のリポソーム熱ショックタンパク質 70 (Hsp70) の定量分析

ステファニー・ブロイニンガー、ヤニナ・エル、クレメンス・クナペ、ソフィー・ギュンター、イヴォンヌ・レーゲル、フランツ・レーデル、ウド・S・ガイプル、ジュン・トルシュタインスドッティル、リディア・ジャンニトラパニ、アン・M・ディキンソン、ガブリエレ・マルソフ

多くの腫瘍において、末梢循環中のストレス誘導性熱ショックタンパク質 70 (Hsp70) レベルの上昇が報告されています。これらの知見に沿って、Hsp70 膜陽性腫瘍細胞は、エキソソーム様脂質小胞で Hsp70 を活発に放出することを私たちは示しました。市販されている Hsp70 酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) のほとんどは、血清中のリポソーム Hsp70 の検出について検証されていないため、モノクローナル抗体 cmHsp70.1 を検出試薬として使用する lipHsp70 ELISA が確立されました。この抗体は、生きた腫瘍細胞上の遊離および膜結合 Hsp70 を認識することが報告されています。ELISA
の検証では、0.36～17.4 ng/ml の濃度範囲で高いアッセイ精度と直線性が示されました。緩衝液および血清サンプル中の添加 Hsp70 の回収率を比較すると、市販の ELISA と比較して、lipHsp70 ELISA を使用した場合の回収率が有意に優れていることが明らかになりました。脂質関連 Hsp70 に関しては、市販の ELISA と比較して、lipHsp70 ELISA で 10 倍高い回収率が見られました。健康なヒトボランティア (n=114) の血液サンプルを分析したところ、lipHsp70 およびコントロール ELISA を使用して、血清 Hsp70 の平均濃度はそれぞれ 6.4 ± 2.7 および 2.8 ± 1.3 ng/ml であることが明らかになりました。Hsp70 血清レベルに、年齢による有意な差は検出されませんでした。lipHsp70 ELISA は血清と血漿に同様に適しており、測定された Hsp70 濃度は、食物摂取、サンプルの繰り返しの凍結融解、または中程度の溶血による影響を受けませんでした。頭頸部がん、肺がん、大腸がん、膵臓がん、神経膠芽腫、または血液悪性腫瘍の患者と健康な人間のボランティアの Hsp70 レベルを比較すると、腫瘍患者のレベルが有意に高いことが明らかになりました。
要約すると、lipHsp70 ELISA は、血清と血漿中のリポソーム Hsp70 と遊離 Hsp70 を測定するための非常に感度が高く堅牢な方法であり、腫瘍の検出と患者の臨床転帰のモニタリングに役立つツールとなる可能性があります。