質量分析と精製技術
オープンアクセス

概要

ロヒツカインの推定のための新しく開発された高感度でシンプルな LCMS/MS 法の再検証と ADME/前臨床薬物動態への応用

アマリンダー・シン、プリヤ・ワジル、パンカジ・チバー、ニチカ・カプール、アミット・クマール、ウトパル・ナンディ、スミット・G・ガンジー、サージート・シン、マノージ・クマール・ティクー、ラム・ヴィシュワカルマ、グルダルシャン・シン

本研究の目的は、血漿中のクロモンアルカロイドであるロヒツカインを測定するための、シンプルかつ迅速で、正確で、再現性があり、感度の高い液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析（LC-MS/MS）法を開発することであった。クロマトグラフィー分離は、高分解能RP18eクロモリスカラム（100 × 4.6 mm、2 μm）を用いて、流速0.5 mL/分で、有機溶媒アセトニトリルと0.1%（v/v）ギ酸（80:20、%v/v）のアイソクラティック組成を用いて行った。多重反応モニタリングで動作するポジティブエレクトロスプレーイオン化（ESI）技術を用いたトリプル四重極質量分析法を使用して、ロヒツカインの場合は306.05>245.10および306.05>231.05、ISの場合は330.30>97.0などのMS/MSイオン遷移を推定した。サンプル調製には、シンプルなシングルステップタンパク質沈殿法を使用しました。この方法は、FDA ガイドラインに従って、特異性、直線性、正確性、精度、回収率、マトリックス効果、安定性について検証されました。分析物の直線性は、マウス血漿中の 0.1 ng/mL から 1000 ng/mL の濃度範囲全体で得られました。薬物動態研究は、経口 (20 mg/kg) および静脈内 (2 mg/kg) 経路で雌 BALB/c マウスで実施され、得られたロヒツカインの経口バイオアベイラビリティは 84% でした。このバイオ分析法は、マウス、ラット、およびヒトの肝臓ミクロソームにおける血漿タンパク質結合研究、透過性、およびミクロソーム安定性の測定に効果的に使用されました。