質量分析と精製技術
オープンアクセス

概要

バイオ分析における赤血球分配と全血血漿比の役割: バラシクロビルとアシクロビルのケーススタディ

アラビンダ・サハ、アジャイ・クマール、サンジャイ・ジャガンナート・グルレ、アルシャド・クルーー、プラティカ・スリヴァスタヴァ

ヒト血漿中のバラシクロビルとアシクロビルの同時評価のための LC-MS/MS 法が開発されました。血漿サンプルは固相抽出法で抽出され、クロマトグラフィー条件は Inertsil CN-3 (5 μm) カラムと移動相 (1 mM 酢酸アンモニウム緩衝液 - メタノール、50:50 v/v) に設定されました。バラシクロビル、アシクロビル、バラシクロビル D4、アシクロビル D4 は、それぞれ質量遷移 (m/z) 325.2→152.1、226.2→152.1、329.3→152.1、230.2→152.1 で多重反応モニタリング モードで正極性で検出されました。バラシクロビルの検証済み検量線範囲は 4.09 ～ 725.63 ng/mL、アシクロビルは 50.35 ～ 10017.29 ng/mL です。方法の開発中、アシクロビルの KWB/P 比は 1 より大きく、バラシクロビルの場合は 1 より小さいため、全血中のアシクロビルの 2 時間にわたる安定性を確立できませんでした。そのため、全血と血漿におけるアシクロビルの薬物分布を調査しました。実験データによると、血漿中のアシクロビル濃度の初期低下は、赤血球によるアシクロビルの細胞内取り込みによるものでした。そのため、添加した比較サンプルは平衡に達するまで放置しました (RBC と血漿の間)。平衡時間 (30.0 分) に達した後、添加した全血から血漿を採取し、提案されたプロトコルに従って処理しました。血液の安定性データから、バラシクロビルとアシクロビルはどちらも血液中で 2 時間安定していると結論付けました。開発された方法は、現在の規制ガイドラインに従って検証され、バラシクロビルとアシクロビルの生物学的同等性研究に適用されました。