アルコール依存症と薬物依存のジャーナル
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概要

分光光度計による融解曲線分析による変異/SNPのスクリーニング：電気泳動および染色を使わない変異検出法に関する予備研究

アリフ・アハマド*、モハマド・シャヒド、モハマド・ライシュ、サイード・アクタル・フセイン

現在利用可能な変異のスクリーニング法では、蛍光標識プローブ/色素または電気泳動、またはその両方が必要であり、これらの方法は面倒で、高価で、時間がかかります。ここでは、プローブ/色素および電気泳動を必要とせずに変異/SNPをスクリーニングする方法について説明します。この技術に必要なのは、PCR産物とペルチェ付き分光光度計だけです。溶融二重鎖によるUVの吸光度を記録することにより、ホモ二重鎖およびヘテロ二重鎖のDNA融解プロファイルと遷移温度をモニタリングして変異をスクリーニングしました。各二重鎖の吸光度は、ペルチェ付き分光光度計を使用して、加熱速度1°C /分で、60°Cから85°Cまで1°Cずつ温度を上げて260 nmで測定しました。ヘテロ二重鎖サンプルでは、​​遷移温度70°CでUVの吸光度が急速に増加します。一方、ホモ二重鎖サンプルでは、​​75°C以降で遷移温度に達します。サンプルの変異は、ホモ二重鎖と比較したヘテロ二重鎖サンプルの遷移温度の低下を観察することで検出しました。