ナノ医療および生物療法発見ジャーナル
オープンアクセス

概要

HPLC-DAD と HPLCESI-MS を用いたヒト血漿と尿中のドーピング薬物の同時分析

ナグラー・シェイバ・アイン・シャムス大学、エジプト

薬物添加血漿および尿中のドーピング薬物の測定に、2 つの液体クロマトグラフィー法が開発されました。1 つ目の方法である HPLC-DAD (ダイオード アレイ検出器) は、AMI (アミロライド)、TOR (トラセミド)、FUR (フロセミド)、IDP (インダパミド) の同時分離および定量に使用されます。また、ATE (アテノロール)、カフェイン、FUR の同時分離および定量にも使用されます。これらは、薬物添加血漿サンプルに適用されます。ただし、ATE は血漿との干渉のため定量的に測定できませんでした。LOD は、AMI、TOR、FUR、IDP、カフェインに対してそれぞれ 0.16、0.15、0.11、0.12、0.25 であることがわかりました。 AMI、TOR、FUR、IDP、カフェインのLOQはそれぞれ0.49、0.45、0.33、0.36、0.75であることがわかりました。2番目の方法であるHPLC-ESI-MS（エレクトロスプレーイオン化質量分析法）は、スパイク尿サンプル中のドーピング薬物の日常的な検出用に開発されました。サンプルごとに1回の注入のみが必要で、現在、14.5分の実行時間で、6種類の利尿薬（FUR、AMI、TOR、ヒドロクロロチアジド（HCTZ）、IDP、スピロノラクトン（SPIRO）、2種類の刺激薬（カフェインとフェニレフリン（PHE））、2種類のβ遮断薬（ATEとビソプロロール）を含む10種類のドーピング薬物を検出できます。分離された化合物の構造に応じて、正と負の両方のイオン化モードが使用されました。ほとんどの薬物の直線範囲は 10 ～ 1000 ngmL-1 でした。すべての親化合物は、尿中濃度が 50 ngmL-1 を大幅に下回る場合に検出できます。開発された方法は、簡単な前処理手順、アセトニトリルによるタンパク質沈殿、および添加血漿と尿の直接希釈です。