音声学と聴覚学ジャーナル
オープンアクセス

概要

最適化されたマンノース受容体の安定発現と特性評価

デビッド・J・ヴィジェラスト、シェレル・ヴィック、バージニア・L・シェパード

マンノース受容体 (MR) は、細菌、真菌、ウイルスの多様な病原体から病原体関連分子パターン (PAMP) を認識するマクロファージ表面受容体です。MR の機能研究は、受容体を発現するヒト細胞株の不足によって妨げられています。MR 生物学の研究に現在利用可能なモデル システムは、多くの場合、発現レベルが低く、従来の MR 特性の多くを保持していません。いくつかの研究室がプラスミドからの MR の一時的および安定した発現を報告していますが、当研究室の予備データでは、これらのプラスミドは重要なドメインを欠き、時間の経過とともに安定しないタンパク質を生成することが示唆されています。この最新のレポートでは、一時的および安定した MR 発現のための新しいヒト コドン最適化システムの作成と特性評価について説明します。mRNA の不安定性に寄与するまれなコドンと配列を変更して、質的および量的に改善された mRNA を作成しました。一時的および安定的に発現された最適化された受容体の共焦点イメージングは​​、以前のレポートと一致する分布を示しています。最適化された受容体の機能特性を実証するために、コドン最適化された MR プラスミドの導入により、MR に関連したS. aureusの貪食作用が非貪食性 HeLa 細胞にもたらされることも示しました。S . aureusの関与と内部化には 3 つの分子が関与していることを示しました。pHrodo 染色されたS. aureusにさらされた後、MR は Toll 様受容体 2 (TLR2) および Rab5 と共局在することがわかりました。これは、細菌粒子の関与と内部化に 3 つの分子が協力していることを示唆しています。この研究では、野生型受容体に類似した機能特性を持つ、トランスフェクション可能な最適化された MR 受容体について説明し、さらに MR の生物学と機能の継続的な研究のための新しいシステムを示しています。