音声学と聴覚学ジャーナル
オープンアクセス

概要

STAT1 は T/C28a2 不死化若年ヒト軟骨細胞株で恒常的に活性化され、IL-6 と可溶性 IL-6R によって刺激される

エヴァン・C・メサロスとチャールズ・J・マレムッド

T/C28a2 不死化若年ヒト軟骨細胞を用いて、組み換えヒトインターロイキン-6 (rhIL-6) または rhIL-6 と可溶性 IL-6 受容体 (sIL-6R) の組み合わせに反応してシグナル伝達および転写活性化因子-1 (STAT1) がどの程度活性化されるかを調べました。STAT1 の 2 つの形態、STAT1A と STAT1B が、SDS-PAGE および抗 STAT1 抗体を用いたウェスタンブロッティングで特定されました。ウェスタンブロッティングにより、STAT1 が恒常的にリン酸化されている (p-STAT1) ことが明らかになりました。T/C28a2 軟骨細胞を rhIL-6 (50 ng/ml) とインキュベートすると、30 分後に p-STAT1A が Δ=22.3% 増加しましたが、このパーセント差はカイ二乗分析では有意には達しませんでした。同様に、30分時点ではrhIL-6 (Δ=+10.7%) のp-STAT1Bに対する効果は見られませんでした。対照的に、rhIL-6とsIL-6Rの組み合わせはp-STAT1Aには効果がありませんでしたが、rhIL-6とsIL-6Rは、30分後にコントロール群と比較してp-STAT1BをΔ=73.3% (p<0.0001) 増加させ、rhIL-6単独と比較してΔ=56.7% (p<0.0001) 増加させました。Janusキナーゼ3特異的阻害剤であるJanex-1 (100 μM) は、rhIL-6のp-STAT1Bに対する効果をΔ=27.7% (p<0.05) 部分的に減少させました。この研究の結果は、STAT1A/STAT1BがT/C28a2軟骨細胞で恒常的に活性化されていることを示しました。 rhIL-6 は p-STAT1B をわずかに増加させましたが、rhIL-6 と sIL-6R の組み合わせは、対照群または rhIL-6 単独と比較して、STAT1B リン酸化を刺激するのにはるかに効果的でした。これらのデータは、T/C28a2 軟骨細胞における JAK3 媒介 STAT1 活性化には IL-6/IL-6R/gp130 経路が関与している可能性を裏付けていますが、これらの結果は、IL-6 に応答した STAT1 活性化には sIL-6R を介した IL-6 トランスシグナリングが優先的に関与していることを示しています。