細胞科学と治療のジャーナル
オープンアクセス

概要

OCT-3/4とKLF-4のTATκ融合タンパク質：標的細胞に融合タンパク質を送達できる安定した混合細胞株

ファズリナ・ノルディン、ジー・ジュン・タイ、ジュープ・ガケン、ファルジン・ファルザネ

急速に増えつつある証拠から、Oct-3/4、KLF4、Sox2、c-Myc などの遺伝子の小さなパネルを強制的に発現させることで、すでに分化した細胞の再プログラミングを誘導し、人工多能性幹細胞 (iPSC) を生成できることがわかっています。しかし、遺伝子改変による iPSC の生成は悪性形質転換のリスクを高めます。そのため、不可逆的な遺伝子改変を行わずに分化した細胞を効率的に in vitro で再プログラミングすることが強く望まれます。合成 TAT-HIV である改良型転写活性化因子カッパ (TATκ) は、複数のタンパク質を標的細胞に送達する能力を付与するため、転写因子または治療薬の潜在的な代替送達メカニズムとなります。緑色蛍光タンパク質 (GFP) とアポプチンをモデルタンパク質として使用し、標的細胞によるタンパク質導入を介した取り込みのために、改変型 HIV-TAT タンパク質導入ドメイン (PTD) を持つタンパク質を分泌する細胞株を生成する戦略を最近説明しました。この戦略を使用して、TATκと融合した多能性因子Oct-3/4またはKLF4を分泌する293T細胞を生成しました。Oct-3/4とKLF4は、形質導入された293T細胞の培養培地で検出され、造血細胞株JURKATおよびFDCP-1によるOct-3/4の取り込みはウェスタンブロット分析によって確認されました。KLF4は産生293T細胞の培養培地に存在していましたが、標的細胞による取り込みはまだ実証できていません。得られた結果に基づいて、これらの安定した混合集団細胞株が治療目的のiPSCの生成に重要な役割を果たすことができると期待しています。