細胞科学と治療のジャーナル
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概要

自己ゲルゾリンと外因性ヌクレオチドの組み合わせは、馬の脂肪由来間葉系間質細胞の軟骨分化を促進する - 試験管内研究

Krzysztof Marycz, Monika Maredziak, Agnieszka Smieszek, Jakub Grzesiak and Anna Siudzinska

背景:現在、獣医学の分野では、間葉系間質細胞の応用に基づく先進的な治療法を用いて、軟骨変性に関連する疾患を治療しています。移植用の細胞を準備するには、in vitro 培養と軟骨形成能の評価が必要です。

目的: 馬血清由来の自己ゲルゾリンと外因性ヌクレオチドが馬脂肪由来間葉系間質細胞 (EqASC) の代謝活性と軟骨分化を促進するかどうかを判断する。

方法:間葉系幹細胞は馬の皮下脂肪組織から分離されました。標準成長培地に 1% のゲルゾリンまたは/および 0.1 mg/ml のヌクレオチドが補充されました。細胞の増殖活性は、細胞毒性アッセイおよび微小胞脱落の分析で得られた結果に基づいて決定されました。形態、細胞生理学的活性および軟骨分化能は、光学顕微鏡、蛍光顕微鏡および走査型電子顕微鏡を使用して評価されました。軟骨形成刺激の効果は、(i) 細胞骨格およびマトリックスタンパク質の遺伝子発現の分析、(ii) プロテオグリカンの組織化学、および (iii) 培養成長パターンおよび軟骨結節形成の分析によって決定されました。

結果:外因性ヌクレオチドで刺激された培養では、増殖活性の増強が認められました。ゲルソリンの添加は EqASC の増殖には影響しませんでしたが、細胞骨格の完全性に寄与しました。どちらも軟骨分化にプラスの影響を与える因子を調査しました。ゲルソリンは細胞骨格タンパク質の発現を安定化し、ヌクレオチドは結節形成を促進します。ゲルソリンとヌクレオチドの組み合わせは細胞増殖を促進し、これは細胞活動の増加と微小胞の脱落に反映され、軟骨結節形成に影響を与えました。

結論:脂肪組織から分離された間葉系間質幹細胞の in vitro 培養に導入された自己ゲルゾリンと外因性ヌクレオチドは、それらの細胞の完全性、増殖、および軟骨分化を増強する可能性があり、したがって馬の変形性関節症の治療に使用される脂肪由来間葉系間質幹細胞移植の再生能力に直接影響を与える可能性があります。