骨研究ジャーナル
オープンアクセス
ISSN: 2572-4916
ISSN: 2572-4916
リンジー・A・ツヴァイアー＝レン、アイリーン・リズ、テレサ・S・ホーリー、ロバート・G・ホーリー
はじめに:染色体転座によるTLX1 (T 細胞白血病ホメオボックス1) 遺伝子の不適切な活性化は、ヒト T 細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)で繰り返し発生する現象です。従来のレトロウイルスベクターを使用してマウス骨髄前駆細胞で TLX1 を異所的に発現させると、不死化細胞株が効率的に生成され、長い潜伏期間を経てマウスに T-ALL 様腫瘍が誘発されます。
方法:レトロウイルス挿入変異が TLX1 の不死化および形質転換機能に及ぼす潜在的な影響を排除するために、TLX1 遺伝子を絶縁された自己不活性化レトロウイルスベクターに組み込みました。
結果:レトロウイルスで形質導入された TLX1 発現マウス骨髄前駆細胞は、増殖/生存上の利点があり、不死化細胞株を容易に生じました。15 の新しく確立された細胞株の広範な特性評価では、共通のレトロウイルス統合部位は明らかになりませんでした。この包括的な分析は、限られた数の細胞株を対象とした以前の研究を大幅に拡張し、造血前駆細胞の不死化に至る一連のイベントを開始するには構成的な TLX1 発現で十分であるという見解をさらに裏付けています。TLX1 不死化細胞を、T 細胞分化に適した条件下で OP9-DL1 単層上で共培養すると、潜在的な T 系統の潜在性が明らかになりました。ただし、細胞は DN2 骨髄性 T (DN2mt)-DN2 T 系統決定 (DN2t) コミットメント ステップを通過できませんでした。分化阻害は、ジンクフィンガー転写因子遺伝子 Bcl11b の上方制御の失敗と一致しており、そのヒト相同遺伝子は、TLX1+ T-ALL 細胞株 ALL-SIL で下方制御された TLX1 の直接の転写標的であることが示されています。他の研究では、TLX1 が有糸分裂チェックポイント停止のバイパスを促進し、異数性につながる能力があることが報告されています。同様に、有糸分裂阻害剤パクリタキセルで処理した二倍体の TLX1 発現 DN2mt 細胞は、有糸分裂チェックポイントをバイパスし、染色体不安定性を示すことがわかりました。これは、Ccna2 (サイクリン A2)、Ccnb1 (サイクリン B1)、Ccnb2 (サイクリン B2)、および Top2a (トポイソメラーゼ IIα) を含む、DNA 複製および有糸分裂に関与する TLX1 転写標的の発現上昇と関連していました。注目すべきことに、ALL-SIL T-ALL 細胞における BCL11B の強制発現は、トポイソメラーゼ IIα 毒であるエトポシドに対する耐性を付与しました。
結論:これまでの知見と合わせて考えると、データは、有糸分裂過程に関与する標的遺伝子の発現異常に起因する染色体不安定性と関連する TLX1 発癌活性のメカニズムを補強するものである。TLX1+ 白血病 T 細胞における異数性 DNA 含有量が必ずしも不良な予後を予兆するわけではないという観察結果について、BCL11B 発現の抑制が一部説明を与える可能性があると推測する。この TLX1 造血前駆細胞不死化/T 細胞分化アッセイは、TLX1 を介した悪性腫瘍への進化のメカニズムの理解を深めるのに役立ち、TLX1+ T-ALL における新規治療薬に対する疾患反応の有用な予測因子となる可能性がある。