JM ワーネケ
はじめに: 線虫の糞線虫は糞線虫症の原因物質であり、糞線虫症はヒトに皮膚、肺、腸の症状として現れ、慢性疾患に移行することも多い。糞線虫感染症の診断は、通常、顔面内で寄生虫の幼虫を見つけることによって行われる。幼虫の排出量は、例えば十二指腸鉤虫の卵の排出量よりも桁違いに少ないため、従来の技術の感度は低い。感度は特定の技術によって高められるが、それでも感染を見逃す可能性がある。糞線虫症は、免疫不全患者にとって潜在的に重篤な感染症である可能性がある。したがって、特に免疫抑制患者の場合、糞線虫症の診断と治療が最も重要であるため、感度と特異性の高い診断方法の提供が望まれる。特に免疫不全患者の場合。この研究の目的は、以前に寄生虫学的方法で分析された免疫抑制患者のサンプルにおけるヒト糞線虫症の診断のための血清学的および分子生物学的方法を評価することです。 この研究では、血清学的および分子生物学的ツールが診断に使用されました。 便ベースの顕微鏡検査と培養技術は感度が不足しているため、いくつかの血清学的方法が使用されました。 DNA検出は、高い感度と特異性を備えた再現可能な結果を示しています。 血清抗体の検出は、診断の代替としてみなされています。 DNA抽出は、以前に記載された方法12に従って実行されました。 簡単に言うと、70％エタノールに保存された便サンプル約500 mgをPBSで2回洗浄しました。 得られたペレットをDNA抽出に使用しました。 5つの異なる血清学的検査の精度を評価し、不衛生な条件により伝染が維持される地域に広く分布する複合参照標準である線虫も使用しました。ヒト宿主における感染は自己感染サイクルを特徴とし、治療せずに放置すると寄生虫が生涯にわたって感染し続ける可能性があります。これは、さまざまな検査結果を組み合わせて得られたものです。最近開発された NIE-LIPS は、ストロンギロイデス感染の感度が 80% を超え、実質的に 100% の特異性を示しました。ここでは、完全に独自の抗ストロンギロイデス IgG ELISA の分析性能を評価しました。
方法:抗Strongyloides ELISA IgG (Euroimmun AG、ドイツ、ルベック) は、S. papillosus から調製した抗原に基づいています。ELISA の感度と特異性は、治療が成功した後、予測可能な時間内にテストが陰性になるか、一貫して力価の顕著な低下を示すことを理想的として評価されました。酵素基質は、0.1 moll/L クエン酸リン酸緩衝液中の 0.03% 過酸化水素を含むオルトフェニレンジアミンです。いくつかの研究では、効果的な治療後に抗体価が低下することが報告されていますが、寄生虫特異的抗体の検出が寄生虫学的診断を補完するのに役立つという考えを支持する研究もいくつかあります。診断免疫学的方法には、酵素結合免疫吸着法が含まれますが、スイス、ベルン大学寄生虫学研究所で適用されている血清学的参照標準と比較して、明確なカットオフ値はまだ定義されていません。適切な診断テストは、S. stercoralis に感染した個人を見つけるため、および集団における感染の蔓延を測定するために不可欠です。 S. stercoralis の主な問題の一つは、全体的な有病率がおそらく過小評価されていることであり、感度パネルは主に、S. stercoralis 感染の評価に最も一般的に使用される糞便ベースの検査の感度の欠如のために構成されている。血清学的検査も非常に有用であるが、その特異性は変動し、社内の参照 ELISA によると抗ストロンギロイデス抗体陽性血清である。特異性/交差反応性パネルには、抗ストロンギロイデス抗体陰性、または他の寄生虫に対する抗体陽性に分類された 39 のコントロール血清が含まれ、これには他の寄生虫感染症 (エキノコックス、フィラリア、回虫、回虫、旋毛虫、肝蛭、住血吸虫、鞭虫、アメーバ、リーシュマニア、マラリア原虫、多重感染; n=25) の患者、癌患者 (n=5)、および健康な献血者 (n=9) からのサンプルが含まれる。境界線上の結果は陽性とみなされた。
結果: 抗ストロンギロイデス ELISA を使用して得られた結果は、すべてのサンプルの 94.6% (53/56) で参照テストと一致しました。感度パネルでは、抗ストロンギロイデス ELISA の各方法の結果が寄生虫学的方法の結果と比較され、一致の程度はカッパ係数 (k) によって決定されました。統計的有意性は p < 0.05 に設定されました。16/17 血清で陽性となり、感度は 94.1% でした。矛盾した結果をもたらした血清 (糞便検体中の幼虫を濃縮技術または培養によって特定することによる糞便検体に基づくストロンギロイデス症の診断) は、複数の感染症の患者から採取されました。コントロール サンプルでは、2/39 のケース (癌患者 1 名と献血者 1 名) で陽性が見つかり、特異度は 94.9% でした。