A. Barbati, L. Cesarini, R. Pellegrino, G.C. Di Renzo, Chia Grenelli
目的:尿中シスタチン C (シスト C) の測定は、腎機能障害の素因がある新生児を早期に特定するための非常に優れた方法です。PETIA、PENIA、EIA は、ヒトの体液中のシスト C の定量測定に使用される免疫測定法ですが、干渉があり、定性分析を行うことができません。本研究では、尿中シスト C の分析における免疫ブロット SDS-PAGE の検証を行います。
方法:尿は、S. マリア デッラ ミゼリコルディア病院の新生児室の新生児から採取しました。尿中シスト C は、SDS-PAGE 電気泳動、免疫ブロット、光学密度の読み取りによって調査されました。
結果:定性分析では、2 つの異なる分子形態が示されました。すべてのサンプルで約 70 KDa の反応性があり、限られた数のサンプルで 13 KDa の反応性がありました。分析精度の変動係数は 10%、分析精度は ± 10% でした。検出限界は 0.009 ng/μL で、検量線は良好な直線性 (範囲 0.02～0.3 ng/μL) を示しました。尿嚢胞 C の安定性は、採取したばかりの尿、またはサンプルを解凍した直後の尿 (最大 6 か月保存) で分析した場合、プロテアーゼ阻害剤を使用しなくても許容範囲内でした。
結論:免疫ブロット SDS-PAGE 分析は、尿嚢胞 C の定性および定量分析を行う有効な方法です。