酵素工学
オープンアクセス

概要

ヒトペプチドが治療誘発性白血病を予防

R. ウィーヘ

ドキソルビシンとエトポシドによる癌治療は、混合系白血病または骨髄性/リンパ性白血病（MLL）遺伝子の再構成のリスクを高めます[1-3]。この遺伝子は、治療関連の0.4 kbホットスポット[2]を含む染色体11上の7.3 kbのブレークポイントクラスター領域（MLLbcr）を包含します。ミトコンドリア酵素エンドヌクレアーゼG（EndoG）は、遺伝毒性治療後に核内に蓄積して複製ストレスを誘発し、MLLbcrを切断することが実証されています[4]。MLLbcr再構成を模倣したGFPベースのレポータープラスミドが設計され[5]、慢性腎不全患者からの分画された凍結乾燥血液濾過ペプチドライブラリーをスクリーニングし、MLLbcr再構成を防ぐヒトペプチドの同定を目指しました。そこで、細胞をペプチドで前処理し、その後エトポシドまたはドキソルビシンに曝露し、FACS 分析で GFP 再構成を検出しました。クロマトグラフィー分画と質量分析を 2 回繰り返した後、細胞周期や細胞死に影響を与えることなく、さまざまな細胞タイプで MLLbcr 再構成を軽減するペプチドを特定しました (画像)。免疫蛍光顕微鏡検査とクロマチン免疫沈降により、ペプチドが核 EndoG の蓄積と MLLbcr の結合を阻害する一方で、全体的な DNA 損傷はペプチドの影響を受けないことが明らかになりました。これらを総合すると、核 EndoG 機能を阻害することで MLLbcr 再構成を防ぐヒトペプチドについて説明しています。