酵素工学
オープンアクセス

概要

UV 変異誘発による Bacillus 属細菌によるプロテアーゼ生産の評価と特性

ネーハ カーンとサントシュ クマール カーン

 Bacillus sp. の表現型変異体は、プロテアーゼ活性を高める能力をテストするために紫外線照射によって開発されました。5 つの変異体のうち、RS1 は​​他の変異体および野生型株と比較してより効率的であることがわかりました。最大のプロテアーゼは、精製および特性評価に使用された Bacillus sp. RS1 株の細胞抽出物から得られました。Bacillus sp. RS1 の培養濾液は硫酸アンモニウム沈殿によって精製されました。培養濾過された上清は、最高の特異的プロテアーゼ活性を示し、培養全体のプロテアーゼ割合の 86% を含んでいました。40-70% の硫酸アンモニウム沈殿を使用してプロテアーゼを精製したところ、濃縮していない上清と比較して特異的活性が 20 倍増加しました。カラム精製では、Bacillus sp. RS1 の濃縮していない上清と比較して特異的活性が 44 倍増加しました。得られた結果に基づき、突然変異株 RS1 がプロテアーゼ酵素の精製に最も適していることがわかりました。精製されたプロテアーゼ酵素は、リン酸緩衝液で pH 7.0 のときに最大活性を示し、最適なインキュベーション時間は 24 時間でした。RS1 から分離されたプロテアーゼは pH 8.5 および温度 60°C で安定しており、さらにこの酵素は商業的に利用することができます。