酵素工学
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概要

N-アセチルシステインがマウス脳のアセチルコリンエステラーゼ活性を低下させる：in vitro 動力学研究

コスタ M、ベルナルディ J、コスタ L、フィウザ T、ブランダン R、ペレイラ M

ここでは、マウス脳アセチルコリンエステラーゼ (AChE) 活性に対する n-アセチルシステイン (NAC) の速度論的 in vitro 研究も実施しました。これは、SH 含有化合物に基づく Ellman の方法論を改善することを目的としたいくつかの研究です。理想的な 5,5´-ジチオビス-2-ニトロ安息香酸 (DTNB) 濃度は 0.3 mM で、理想的な培地 pH は 7.4 でした。AChE は、テストしたすべてのアセチルチオコリン ヨウ化物 (ATCh) 濃度 (0.025-0.450 mM) に対して線形活性を示しました。DTNB-NAC 相互作用干渉を回避するために、アッセイ法に 30 秒 (いわゆる安定化時間) を適用しました。テストしたすべての NAC 濃度に対して Km (mM) に違いは見られませんでした。75 μM から開始した NAC 濃度では、Vmax に有意な違いが見られ、NAC によって誘発される非競合型の AChE 活性阻害を特徴付けています。結論として、NAC は in vitro で AChE 活性を低下させ、SH 基を含む化合物によって阻害された場合の AChE 活性の分析には Ellman 法が信頼できるものでした。